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Escherichia coli, E. coli, es una bacteria que crece en el intestino delgado de los mamíferos. Esta bacteria se descubrió por primera vez a finales de 1800. Desde entonces, ha tenido una larga historia de uso en investigación científica. Es el organismo más utilizado en genética molecular. Parte de la razón por la que E. coli se usa comúnmente en la investigación científica es que es fácil de cultivar en un laboratorio. Los factores que hacen que E. coli sea fácil de cultivar son sus simples necesidades nutricionales, su rápida tasa de crecimiento y sus moderados requisitos de mantenimiento.
Esterilice el asa de inoculación colocándolo en la llama del mechero Bunsen. Pase la mitad inferior del lazo a través de la llama hasta que se ilumine en rojo.
Deja que el lazo se enfríe. Puede tocarlo con el agar estéril en la placa para asegurarse de que se haya enfriado. No coloque el aro sobre la mesa ni permita que entre en contacto con otra cosa que no sea agar estéril o el cultivo deseado ahora que ha sido esterilizado.
Sumerja el asa en el cultivo de E. coli y luego retírelo.
Abra la placa de agar y deslice suavemente el lazo hacia adelante y hacia atrás a través de la superficie de una sección del agar. Tenga cuidado de no rayar el agar con el asa. El agar proporciona los nutrientes que la E. coli necesita para crecer.
Coloque el aro en la llama del mechero Bunsen nuevamente para esterilizarlo. Una vez que la varilla del bucle se enfríe, tóquela en una sección estéril de la placa para asegurarse de que esté fría, luego deslice el bucle a través de su primera raya para hacer una segunda raya. Esta segunda racha es una versión diluida de la primera racha. Repita este proceso de esterilización y deslizamiento hasta que se hayan deslizado varias secciones de la placa de agar. La razón por la que hace esto es para que luego pueda elegir entre colonias clonales individuales. Esto ayudará a asegurarse de que tenga al menos una sección que tenga colonias individuales, no demasiado concentrada (que tendrá demasiado crecimiento y no le permitirá elegir de una sola colonia) y no demasiado diluida (lo que no daría colonias) .
Esterilice el lazo en la llama por última vez antes de ponerlo a un lado en el área de trabajo.
Vuelva a colocar la parte superior en la placa de agar. Voltee la placa y colóquela en la incubadora a 37 grados Celsius (98.6 grados Fahrenheit). Esta temperatura de incubación ideal simula la temperatura del cuerpo humano donde reside E. coli. Dentro de las 24 a 48 horas, aparecerán colonias visibles de bacterias E. coli en la placa de agar.