Contenido
- Mejor visualización
- Identificación y clasificación
- Detección de viabilidad
- Identificación de estructuras celulares
Los microbiólogos estudian las características de microorganismos como algas, protozoos, bacterias, hongos y virus usando un microscopio. Si bien algunos organismos, como los protozoos y las células de levadura, son fáciles de observar con un soporte húmedo, las células bacterianas requieren tinción. Los científicos desarrollaron varios métodos, como la tinción de Gram, la tinción ácido-rápida y la tinción fluorescente para una mejor visualización de las células bacterianas y las estructuras celulares. Usando tales métodos de tinción, es posible identificar características estructurales que ayudan a clasificar las bacterias.
Mejor visualización
Los organismos bacterianos son tan pequeños que la mayoría de ellos son visibles solo bajo un microscopio con un poder de aumento de 1000X. Sin embargo, la mera ampliación del tamaño no proporciona un grado suficiente de claridad, por lo que las bacterias deben teñirse antes de la observación para proporcionar la claridad necesaria para la visualización.
Identificación y clasificación
La tinción de bacterias para distinguir entre tipos bacterianos se conoce como tinción diferencial. La tinción de Gram es una de esas manchas diferenciales que distingue entre bacterias en función de su contenido en la pared celular. En este método, las células bacterianas reaccionan con una mancha de cristal violeta para tomar un color violeta. Al agregar un agente antimanchas, algunas células bacterianas pierden color mientras que otras no. Al agregar la tinción de safranina, las células decoloradas toman la mancha para que se vea roja, mientras que las células bacterianas que no perdieron color permanecen violetas. Las células bacterianas que toman el color rojo se llaman organismos Gram negativos y las que no toman el color se clasifican como organismos Gram positivos. La tinción de Gram proporciona un método rápido para la identificación inicial de bacterias involucradas en infecciones. Del mismo modo, el procedimiento de tinción ácido-rápida ayuda a identificar específicamente los organismos que pertenecen a la clase de bacterias llamadas micobacterias, como Mycobacterium tuberculosis.
Detección de viabilidad
En muestras de cultivo bacteriano, a menudo es importante detectar la presencia de células bacterianas vivas. Los métodos de tinción como la tinción fluorescente ayudan a identificar si las células de cultivo son viables o no. Las bacterias vivas tienen la capacidad de convertir la mancha de cloruro de 5-ciano-2,3-ditoliltetrazolio (CTC) en un tinte que muestra una fluorescencia roja. Por lo tanto, cuando los cultivos teñidos con CTC emiten dicha fluorescencia, indica la presencia de bacterias viables. El yoduro de propidio es una mancha que actúa solo en las células no vivas que poseen membranas dañadas y, por lo tanto, es útil para identificar células bacterianas muertas.
Identificación de estructuras celulares
La tinción proporciona un método para visualizar claramente varias estructuras celulares. Por ejemplo, el método de tinción de Fuelgen permite la identificación del núcleo dentro de las células bacterianas, mientras que la tinción de Albert es útil para visualizar gránulos metacromáticos. Del mismo modo, la técnica de impregnación de plata permite la identificación de espiroquetas. Los flagelos son fáciles de observar cuando se tiñen con la mancha de Ryu. La tinción verde de malaquita ayuda a identificar las esporas bacterianas.