Como es el caso cuando se usa cualquier instrumento científico, debe asegurarse de que el instrumento esté en buen estado de funcionamiento antes de usarlo para analizar una muestra. Verificar la respuesta del instrumento para una muestra conocida verifica que el instrumento esté calibrado adecuadamente. Los espectrofotómetros requieren una calibración periódica para garantizar la respuesta correcta del instrumento. Los espectrofotómetros de infrarrojos (IR) usan poliestireno como estándar de calibración. Un escaneo del instrumento con una pieza de poliestireno en el soporte de la muestra verificará la presencia de picos observados en los espectros IR y la intensidad relativa de los picos.
Encienda el espectrofotómetro y permita que se caliente durante al menos 10 minutos. Se requiere el tiempo de calentamiento para que la fuente se estabilice. Sin una fuente estable, no puede confiar en los espectros obtenidos. La señal analítica se basa en la atenuación de la fuente de radiación por la muestra.
Ejecute el estándar de calibración colocando una pieza de película de poliestireno en el soporte de la muestra. Sin una prueba que utilice una muestra de espectros conocidos llamada estándar, no tiene certeza de que el espectrofotómetro funcione correctamente.
Recupere los espectros para la muestra de poliestireno. Compare los espectros con el de una referencia estándar de espectros IR. Asegúrese de que todos los picos esperados existan en los espectros de prueba. La ubicación de los picos debe alinearse con la longitud de onda de absorción.
Verifique los espectros para asegurarse de que la intensidad de la señal esté dentro del 95 por ciento del máximo para el pico más fuerte. Si el pico más fuerte en el espectro es más o menos que la escala completa, ajuste la atenuación para entregar la intensidad de señal correcta.
Calibre el espectrofotómetro IR a menudo. Una frecuencia mínima de calibración debe incluir un escaneo justo antes y uno después de su trabajo del día.