Contenido
Los científicos e investigadores estudian el crecimiento bacteriano preparando cultivos en un laboratorio. Las placas de Petri que contienen agar nutritivo cultivan cultivos bacterianos a partir de un solo golpe o inoculación. Los estudiantes pueden preparar agar nutritivo en casa usando suministros de supermercados o tiendas naturistas para un proyecto de feria de ciencias. Los electrodomésticos de cocina convencionales y los utensilios de cocina básicos proporcionan las herramientas para preparar un medio de cultivo estéril que se puede dispensar en placas de Petri. Seguir técnicas estériles calentando los materiales y manteniendo las superficies limpias y secas mejorará los resultados al evitar que el moho y las partículas contaminen el cultivo.
Coloque un filtro de café en un colador y cuelgue el colador sobre la abertura del recipiente transparente.
Vierta lentamente el caldo en el filtro, asegurándose de que el caldo no se desborde por los lados del filtro. Si el filtro se obstruye con partículas, retire el filtro usado, reemplácelo con un filtro limpio y continúe vertiendo el caldo.
Retire el filtro y el filtro de la parte superior del tazón y observe si el caldo parece transparente (es decir, no hay partículas suspendidas en el líquido). Si las partículas flotan en el líquido, repita los pasos 1 y 2 con un segundo recipiente transparente y un filtro de café recién hecho.
Coloque la olla en la estufa y vierta el caldo transparente en la olla.
Agregue 16 onzas de agua destilada a la olla que contiene el caldo.
Encienda la estufa y ajuste el fuego a medio-bajo. Calienta el caldo a fuego lento (es decir, aparecen pequeñas burbujas cerca del costado de la olla).
Agregue 1 cucharadita del polvo de agar-agar al caldo a fuego lento (aproximadamente 2.5 gramos) y agite la mezcla hasta que el polvo se disuelva. Asegúrate de remover el polvo para disolverlo y evitar que la gelatina se hunda hasta el fondo de la olla (donde puede quemarse).
Repita el paso 7 hasta que todo el polvo de agar-agar se haya disuelto en el caldo.
Continúe revolviendo el caldo durante aproximadamente 1 minuto para asegurarse de que todo el polvo esté completamente disuelto.
Apague la estufa, coloque la tapa en la olla y deje que el líquido se enfríe durante al menos 15 minutos.
Organice las placas de Petri estériles en una fila para facilitar el ensamblaje, pero no retire las tapas. Si lo desea, coloque un salvamanteles para sostener la olla caliente. Si está utilizando tazas de crema con tapa en lugar de platos de Petri, esterilice las tazas de crema colocando las tazas y las tapas invertidas (boca abajo) en una bandeja para galletas cubierta con papel de aluminio y hornee durante al menos una hora a 375 grados Fahrenheit. Asegúrese de que las tazas y tapas esterilizadas estén completamente frías antes de usar.
Toque con cuidado el exterior de la olla para verificar que esté caliente al tacto y coloque la olla en el salvamanteles. Si la olla está demasiado caliente al tacto, espere al menos 10 minutos para que se enfríe.
Retire la tapa y reserve. Coloca el cucharón en la olla.
Retire la tapa de una placa de Petri y dispense caldo de nutrientes para llenar la placa hasta la mitad. Cubra el plato inmediatamente con su tapa.
Repita el paso 14 para cada una de las placas de Petri.
Permita que el caldo de nutrientes se solidifique en las placas de Petri durante al menos 1 hora, sin molestias.
Agite suavemente las placas de Petri de lado a lado para verificar que el caldo de nutrientes se haya solidificado por completo. Si el caldo no está completamente gelificado, espere otros 20 minutos antes de revisar nuevamente.
Cubra una mesa o superficie plana con un rollo de toallas de papel para crear un área de trabajo estéril. Rasgue una toalla de papel y dóblela cuatro veces para crear un taco grueso y rectangular. Coloque este taco en un extremo del área de trabajo.
Transfiera una placa de Petri al área de trabajo estéril y retire la tapa. Con cuidado, voltee el plato y coloque un extremo en el costado del taco doblado, de modo que quede invertido y ligeramente angulado (con un pequeño espacio por el taco de toalla de papel).
Voltee la tapa y colóquela sobre la placa de Petri en la superficie de trabajo estéril. Si aparecen gotas de agua en la tapa, sacúdala suavemente antes de colocarla sobre la superficie cubierta, pero no toque el interior de la tapa.
Repita los pasos 19 y 20 para cada placa de Petri, colocando un lado de la placa invertida en el lado de la placa anterior en lugar de la toalla de papel. Los platos aparecerán como un conjunto escalonado, con espacios en un lado para que el exceso de humedad pueda evaporarse.
Mire las placas de Petri invertidas para verificar si la humedad en los lados de las placas se evaporó. Una vez que se haya despejado toda la humedad, voltee las placas con el lado derecho hacia arriba e inmediatamente cúbralas con las tapas para su uso.
Inocular el agar nutritivo en la placa limpiando un hisopo que contenga el cultivo deseado en la superficie del agar nutritivo antes de cubrirlo con la tapa. Voltee la placa de Petri para que el sólido quede encima. Almacene la placa de Petri inoculada con el sólido en la parte superior para el cultivo y la tapa en la parte inferior para atrapar cualquier humedad, partículas sueltas o crecimiento.