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La bioquímica estudia moléculas como el ADN, el ARN y las proteínas. Las técnicas de transferencia son lo que los científicos usan para separar estos tipos de moléculas. En las células, existen como una mezcla. La transferencia permite a los investigadores encontrar una proteína entre muchas, como una aguja en un pajar. La transferencia generalmente se realiza dejando que una mezcla de ADN, ARN o proteína fluya a través de una losa de gel. Este gel permite que las moléculas pequeñas se muevan más rápido que las más grandes. Las moléculas separadas se presionan contra una membrana, lo que ayuda a mover las moléculas del gel a la membrana. Las moléculas se adhieren a la membrana, pero permanecen en la misma ubicación, separadas entre sí, como si todavía estuvieran en el gel.
Western Blot
La transferencia Western es una técnica común para separar proteínas por tamaño, pero en columnas rectas. Estas columnas paralelas permiten a los investigadores comparar la cantidad de una proteína en diferentes muestras que se ejecutan una al lado de la otra, como pistas de boliche. Por ejemplo, si estuviera probando el efecto de diferentes cantidades de un medicamento sobre el crecimiento celular, trataría cuatro grupos diferentes de células con una cantidad diferente de medicamento. Luego, podría romper las células y abrir las proteínas de cada grupo en carriles separados en un gel. Extender las proteínas de esta manera le permite ver lo que una concentración creciente de medicamentos le hace a una determinada proteína.
Northern Blot
La transferencia Northern se usa para detectar ARN. Las células se pueden romper para liberar su ARN. El ARN de diferentes tipos de células se puede ejecutar en carriles separados en un gel. El gel extiende los diferentes ARN por tamaño. Estas filas ordenadas y paralelas de ARN permiten al investigador comparar qué tipo de célula tiene qué cantidad de ARN. Este método permite a un investigador determinar si las células de una determinada enfermedad tienen más de este ARN o menos de ese ARN. La transferencia Northern puede revelar cómo funciona una enfermedad a nivel de producción de ARN.
Southern Blot
La transferencia Southern es la técnica original de transferencia, que inició el sistema de nombres. Fue inventado por Edwin Southern. La transferencia Southern se usa para detectar la cantidad de ADN en una mezcla. Al igual que con las proteínas y el ARN, el ADN de una célula se puede liberar cuando esa célula se rompe. La transferencia Southern separa el ADN de diferentes tipos de células por tamaño. El ADN de cada muestra se distribuye en carriles limpios y paralelos. Se pueden detectar piezas individuales de ADN utilizando una sonda radioactiva o fluorescente, que está diseñada para unirse solo a esa pieza de ADN. La señal de energía de una sonda radioactiva, o los destellos de luz de una señal fluorescente, les dice a los investigadores cuánto de ese fragmento de ADN hay en cada muestra.
Otras manchas
Las tres técnicas principales de transferencia (occidental, norte y sur) se han modificado de diferentes maneras para detectar moléculas ligeramente diferentes. La transferencia Western vs la transferencia Southern, por ejemplo. detecta proteínas y ADN, respectivamente. Cada técnica modificada generalmente se realiza de la manera habitual, pero utiliza un método diferente para detectar la molécula que se está extendiendo en los carriles paralelos. Las transferencias de Southwestern detectan moléculas de proteína adheridas al ADN. Las transferencias de Northwestern detectan moléculas de proteína adheridas al ARN. Las transferencias de Farwestern detectan moléculas de proteínas adheridas a otras proteínas.