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Aunque no se pueden ver a simple vista, las bacterias están en todas partes. Existen en los alimentos, el suelo, el agua, las superficies dentro de nuestros hogares y en nuestros cuerpos. Las bacterias generalmente existen en poblaciones mixtas. El aislamiento de una bacteria específica de otras especies bacterianas en una muestra dada permite a los microbiólogos estudiar su estructura y función, características utilizadas en su identificación. Los microbiólogos a menudo aíslan las bacterias usando una de varias técnicas de placa de rayas.
Herramientas
Se usa un asa de inoculación para transferir microorganismos. Consiste en un alambre de nicromo o platino con un pequeño lazo circular en un extremo. El otro extremo es recto y se desliza en un mango. También hay disponibles inoculadores de plástico desechables. Las bacterias solo pueden aislarse si crecen. Los microbiólogos cultivan bacterias para el aislamiento de placas estriadas en placas de Petri redondas y poco profundas rellenas con un medio sólido, llamado agar. El agar imita el entorno en el que las bacterias crecen naturalmente. Los platos llenos de medios son estériles y están tapados para evitar el crecimiento de organismos no deseados. Durante el aislamiento de la placa rayada, el asa de inoculación se esteriliza repetidamente en la llama de un mechero Bunsen.
Principio
La técnica de placa estriada es el método más popular para aislar bacterias específicas de una muestra que contiene una mezcla de microorganismos. La técnica esencialmente diluye el número de organismos y reduce su densidad. Permite a los microbiólogos distinguir y aislar colonias bacterianas individuales. Una colonia es un grupo visible de bacterias. Todas las bacterias en una sola colonia se originan de la misma célula bacteriana. En consecuencia, las colonias individuales son colonias "puras". La colonia pura se transfiere a otra placa para producir un cultivo puro que consiste en un tipo de bacteria.
Procedimiento
Cuando se hace correctamente, el aislamiento de la placa raya diluye una muestra y permite que las células bacterianas individuales se desarrollen en colonias aisladas. Un microbiólogo comienza esterilizando el asa de inoculación en una llama. Enfría el aro tocándolo con el agar, luego sumerge el aro en la muestra y lo extiende hacia adelante y hacia atrás para cubrir una sección de la placa. Ella esteriliza el bucle, lo enfría e inocula una segunda sección adyacente de la placa arrastrando el bucle a través de la primera sección varias veces y cubriendo la segunda sección con un movimiento en zigzag. Esto recoge una pequeña cantidad de bacterias de la primera sección y las transfiere a la segunda sección. El número de veces que se repite este procedimiento básico depende del método de placa de rayas utilizado. A pesar del método, la muestra original se usa para inocular solo la primera sección de la placa.
Método de placa de rayas
Los métodos de placa de rayas varían según el número de secciones de agar con rayas. El método T-streak utiliza tres secciones: la mitad superior y dos secciones inferiores de igual tamaño. El inóculo inicial se coloca en la mitad superior de la placa. Las bacterias son arrastradas desde la sección superior a una de las secciones inferiores, luego desde esa sección inferior a la otra. En el método del cuadrante, cuatro secciones de igual tamaño están rayadas. El método de rayas continuas generalmente implica inocular la mitad superior de la placa, rotarla 180 grados e inocular la otra mitad de la placa sin esterilizar el asa o arrastrar las bacterias de la sección anterior.